无性杂交asxual hybridization

使两个亲本的原生质体融合成为一个具双亲遗传物质的杂种细胞， 并在人工培养下使之形成杂种果树的杂交方法。无性杂交不受亲缘关系限制， 特别是某些不能有性杂交的果树， 可以采用无性杂交方法育种， 培育新的果树类型。其选择杂交亲本的范围比有性杂交更广泛， 遗传基础更复杂。因此无性杂交对果树遗传和育种的研究具有重要的意义。
生物学家在20世纪60年代初开始研究体细胞杂交技术， 如异种DNA分子的引入， 线粒体， 叶绿体和核的移植， 或原生质体的融合等。70年代以来， 通过原生质体融合技术， 已成功地获得烟草， 矮牵牛的种间或品种间杂种。1985年的枳壳与Trovita橙的原生质体融合获得的植株， 是柑橘无性杂交所取得的最新成果。
无性杂交技术， 一般包括原生质体的分离， 异种原生质体的融合， 异核体的选择和培养成细胞团， 然后再分化成植株。例如日本小林省藏等 (1985年)从Trovita甜橙的珠心胚和枳壳实生苗的叶片分离的原生质体，用PEG6000为细胞融合剂，在MT培养基中添加0.6M的蔗糖和0.6%琼脂， 原生质体接种密度为10⁵/毫升， 培养后由枳壳来的原生质体逐渐消失， 甜橙原生质体逐渐形成不定形的白色群落， 并进一步形成绿色的胚状体，将胚状体转入分化培养基继续培养，便发育成具有三出复叶的植株， 其染色体数36条， 为双二倍体， 并从叶精油成分分析结果， 也确认是由体细胞融合的杂种。
外源DNA分子的导入， 采用基因工程进行异种基因的转移。大致步骤为： 获得目的基因； 目的基因与载体结合成重组DNA分子； 重组DNA分子引入受体细胞， 再筛选和表达。
细胞器的摄取， 采用甲种原生质体摄取乙种细胞的质体， 线粒体， 叶绿体或核等细胞器， 从而产生新型的杂种细胞。